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Met双切口酶质粒(m) | sc-421635-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Met 基因编码受体酪氨酸激酶 MET,是肝细胞生长因子(HGF)的同源受体,也是上皮—间质信号传导的核心调控因子。配体结合后,MET 的自磷酸化会启动下游级联反应,包括 PI3K–AKT、RAS–MAPK、STAT 以及 SRC/FAK 等通路,从而协调细胞增殖、生存、迁移与形态发生。MET 信号参与器官发生与组织再生等发育程序;其失调也被广泛用于研究侵袭性生长与致癌通路重塑。在小鼠体系中,Met 的功能常在肿瘤进展、基质相互作用以及创伤修复生物学等模型中被深入探究。
Met 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Met 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Met内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Met的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Met基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。