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MEF-2A双切口酶质粒(h) | sc-400484-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MEF-2A双切口酶质粒(h2) | sc-400484-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MEF2A 编码肌细胞增强因子 2A(myocyte enhancer factor 2A,MEF-2A),是一种 MADS-box/MEF2 家族转录因子,可整合钙信号与 MAPK 依赖性信号,从而调控细胞类型特异性的基因表达程序。MEF-2A 参与由染色质状态与辅因子共同控制的转录网络,位于 CaMK、钙调神经磷酸酶–NFAT、p38 MAPK 以及 IIa 类 HDAC 介导的抑制等通路的下游,将细胞外刺激与分化、生存及应激反应连接起来。它广泛参与肌肉与神经元基因表达的调控,并与活动依赖性转录相关。MEF2A 信号失调与心血管及神经发育相关表型有关,因此是在人类细胞模型中探究转录调控回路的有用靶点。
MEF-2A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MEF2A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MEF2A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MEF2A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MEF2A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。