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MDM2双切口酶质粒(m) | sc-421611-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MDM2双切口酶质粒(m2) | sc-421611-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Mdm2 编码 E3 泛素连接酶 MDM2,它是 TP53 的关键负调控因子,负责调控 p53 的稳定性、核定位及转录输出。MDM2 通过促进 p53 的泛素化并引导其经由蛋白酶体降解,从而在包括 ATM/ATR–CHK 通路在内的应激信号网络中,调节 DNA 损伤应答、细胞周期检查点、凋亡与细胞衰老。MDM2 还与核糖体应激信号以及 p53 轴的反馈调控相互联结,从而在致癌或基因毒性应激条件下塑造细胞结局。Mdm2 表达或活性失调常与异常抑制 p53 通路相关,并被广泛用于肿瘤发生、基因组完整性与发育稳态等研究模型中。
MDM2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Mdm2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Mdm2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Mdm2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Mdm2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。