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MCM7双切口酶质粒(h) | sc-400900-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MCM7双切口酶质粒(h2) | sc-400900-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MCM7 编码微小染色体维持蛋白(MCM2–7)解旋酶复合体的核心亚基之一,该复合体负责对复制起始点进行“许可”,并在 S 期推动 DNA 解旋。作为复制前复合体的一部分,MCM7 与 CDC45 和 GINS 协同作用,支持复制叉推进、维持基因组稳定性以及细胞周期检查点应答。MCM7 表达失调或复制许可过程异常,会导致复制应激、异常增殖以及多种肿瘤类型中常见的染色体不稳定。MCM7 也常在 DNA 损伤耐受以及致癌基因诱导应激条件下复制因子蛋白稳态调控等研究背景中被关注。
MCM7 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MCM7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCM7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MCM7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MCM7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。