Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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MCM3双切口酶质粒(h): sc-402076-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- MCM3 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- MCM3双切酶质粒（h）和MCM3双切酶质粒（h2）编码针对MCM3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：MCM3: sc-390480，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
MCM3双切口酶质粒(h) | sc-402076-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
MCM3双切口酶质粒(h2) | sc-402076-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MCM3 编码微小染色体维持复合物成分 3（minichromosome maintenance complex component 3），是 MCM2–7 解旋酶的核心亚基之一，在 S 期参与复制起始位点授权（origin licensing）以及 DNA 复制叉推进所必需。作为复制前复合物（pre-replication complex）的一部分，MCM3 与 CDC45 和 GINS 协同作用，驱动复制体（replisome）组装，从而维持基因组稳定性并确保染色体被准确复制。MCM3 依赖的复制动力学一旦受到扰动，可能引发复制压力、细胞周期检查点异常以及 DNA 损伤累积——这些过程常在肿瘤生物学和增殖性疾病研究中被重点关注。因此，MCM3 常被用作研究 DNA 复制调控、复制压力应答以及细胞周期调控机制的切入点。
MCM3 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MCM3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MCM3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MCM3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MCM3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。