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MAGE-A1双切口酶质粒(h) | sc-401056-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
MAGE-A1双切口酶质粒(h2) | sc-401056-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MAGEA1 编码 MAGE-A1,这是一种癌睾抗原(cancer-testis antigen),通常仅限于免疫豁免的生殖系组织中表达,但在多种肿瘤类型中会出现异常表达,因此被广泛用作肿瘤相关转录程序的标志物。MAGE-A1 可与 E3 泛素连接酶及相关的蛋白质质量控制机制相互作用,使其与蛋白稳定性调控、应激反应以及依赖情境的细胞信号调节相关联。其表达受 DNA 甲基化、染色质重塑等表观遗传机制影响,从而将 MAGEA1 与转录抑制及去抑制的通路联系起来。在研究中,MAGEA1 常用于探讨其在抗原呈递与免疫识别、肿瘤细胞可塑性方面的作用,以及表观遗传失调如何促使谱系不相称的基因表达。
MAGE-A1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 MAGEA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MAGEA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏MAGEA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了MAGEA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。