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LDLR双切口酶质粒(h) | sc-400645-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LDLR双切口酶质粒(h2) | sc-400645-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
低密度脂蛋白受体(LDLR)是一种位于细胞表面的内吞受体,可结合含载脂蛋白B和E的脂蛋白,并介导LDL颗粒通过网格蛋白依赖性途径内吞,从而调控细胞胆固醇摄取及全身脂质稳态。内吞后,LDLR通常在酸性内体中与配体解离,并回收到质膜,将受体转运与胆固醇感知和膜生物发生联系起来。LDLR活性与SREBP调控的转录程序、细胞内胆固醇酯化以及脂质代谢的反馈调节相互衔接。LDLR表达或功能的改变在血脂异常生物学和动脉粥样硬化相关通路研究中被广泛关注,也常用于建立脂蛋白摄取与受体回收的细胞模型。
LDLR 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LDLR 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LDLR内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LDLR的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LDLR基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。