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LASS6双切口酶质粒(h) | sc-403901-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
LASS6双切口酶质粒(h2) | sc-403901-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CERS6 编码神经酰胺合成酶6(LASS6),这是一种定位于内质网的酶,优先生成 C16-神经酰胺。C16-神经酰胺是一种关键的生物活性鞘脂,可调控膜组成与信号传导。通过控制神经酰胺的丰度,LASS6 影响鞘脂代谢,并与调控细胞凋亡、自噬、内质网应激反应以及炎症信号传导等通路发生交叉。CERS6 活性改变与脂质稳态失衡相关,并与癌细胞存活与迁移、代谢应激以及神经炎症过程等相关表型有关。作为神经酰胺—鞘磷脂—糖鞘脂相互转化网络中的一个节点,CERS6 常被用于研究脂质重塑如何连接细胞器功能与应激适应程序。
LASS6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CERS6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CERS6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CERS6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CERS6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。