Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Ki67 Antibody (Ki-67) Alexa Fluor® 647: sc-23900 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of Ki67 expression in Raji whole cell lysate. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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Ki67双切口酶质粒(h): sc-400081-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Ki67 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Ki67双切酶质粒（h）和Ki67双切酶质粒（h2）编码针对MKI67的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Ki67: sc-23900，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Ki67双切口酶质粒(h) | sc-400081-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Ki67双切口酶质粒(h2) | sc-400081-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
MKI67 编码 Ki67，这是一种与染色质相关的核蛋白，被广泛用作细胞处于活跃细胞周期的标志物；其表达在 S/G2/M 期达到峰值，而在静止的 G0 期细胞中不表达。Ki67 参与高阶染色体组织，并支持有丝分裂期染色体周缘结构的形成，从而有助于维持正确的染色体分离和细胞分裂动力学。由于与增殖程序紧密耦联，Ki67 与细胞周期调控网络相互交织，常被用于研究生长控制与复制压力应答。MKI67 表达失调通常与多种肿瘤类型中的高增殖状态相关，这也凸显了其在细胞周期调控与肿瘤生物学机制研究中的价值。
Ki67 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 MKI67 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对MKI67内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏MKI67的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了MKI67基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。