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JAM-A双切口酶质粒(h) | sc-400687-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
JAM-A双切口酶质粒(h2) | sc-400687-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
F11R 编码连接黏附分子 A(junctional adhesion molecule A,JAM-A),这是一种免疫球蛋白超家族受体,富集于紧密连接处,在那里调控上皮与内皮屏障的完整性。JAM-A 参与细胞—细胞黏附、细胞极性建立以及依赖接触的信号传导,并通过与整合素和支架蛋白相互作用来调节白细胞跨内皮迁移。通过与连接复合体及小 GTP 酶通路的耦联,JAM-A 影响细胞骨架组织与旁细胞通透性。JAM-A 的表达或定位失调与炎症性屏障功能障碍以及细胞迁移表型改变相关,这些变化与肿瘤生物学和血管病理密切相关。
JAM-A 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 F11R 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F11R内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏F11R的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了F11R基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。