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IQGAP1双切口酶质粒(m) | sc-424375-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IQGAP1双切口酶质粒(m2) | sc-424375-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Iqgap1 基因编码 IQGAP1,这是一种多结构域的支架蛋白,可协调肌动蛋白细胞骨架重塑与膜运输及信号转导。IQGAP1 可结合 CDC42、RAC1 等小 GTP 酶,并与 β-连环蛋白、钙调蛋白以及 MAPK 通路组分相互作用,从而调控细胞极性、黏附、迁移和胞质分裂。通过这些相互作用,它有助于整合调控细胞连接稳定性与细胞骨架动态重排的多条通路;这些过程常用于研究组织形态发生和免疫细胞运动。IQGAP1 相关信号的失调以及细胞—细胞黏附程序的改变,常在炎症、纤维化和肿瘤相关表型模型中被研究,支持其在疾病机制研究中的重要性。
IQGAP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Iqgap1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Iqgap1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Iqgap1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Iqgap1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。