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IQGAP1双切口酶质粒(h) | sc-400597-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IQGAP1双切口酶质粒(h2) | sc-400597-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
IQGAP1 基因编码 IQGAP1 蛋白,这是一种多结构域的支架蛋白,能够整合来自 Rho 家族 GTP 酶、钙调蛋白以及细胞骨架调控因子的信号,从而协同调控肌动蛋白动态、细胞极性和膜运输。IQGAP1 将黏附复合体与肌动蛋白细胞骨架连接到包括 MAPK/ERK 和 Wnt/β-连环蛋白在内的信号通路上,进而影响细胞迁移、增殖与胞质分裂。通过与 CDC42、RAC1、β-连环蛋白、E-钙黏蛋白以及 exocyst 复合体成分等蛋白相互作用,IQGAP1 有助于在细胞前缘和细胞-细胞连接处组织空间上受限的信号传导。IQGAP1 的表达或定位失衡与多种肿瘤相关情境中的上皮完整性改变、侵袭性行为及致癌信号异常有关,因此它是研究与转移相关过程机制的一个重要节点。
IQGAP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IQGAP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IQGAP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IQGAP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IQGAP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。