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Integrin α6/ITGA6/CD49f双切口酶质粒(m) | sc-421164-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
Itga6 编码整合素α6(ITGA6/CD49f),这是一种α亚基,主要与β1或β4形成异源二聚体,构成能够结合层粘连蛋白(laminin)的受体,从而将细胞锚定在基底膜上。ITGA6 参与黏着斑与半桥粒的组织,通过 FAK/Src、PI3K–AKT 和 MAPK 等通路,将细胞外基质的结合转化为细胞内信号,调控黏附、生存与迁移。在小鼠组织中,整合素α6 在上皮以及干细胞/祖细胞区室中相对富集,在发育和组织稳态过程中影响细胞极性及其与微环境(niche)的相互作用。ITGA6 表达或信号传导失调常见于细胞–基质黏附改变、侵袭程序启动以及炎症性重塑等研究背景,因此在机制性疾病模型中具有重要相关性。
Integrin α6/ITGA6/CD49f 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Itga6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Itga6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Itga6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Itga6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。