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Integrin α1/ITGA1/CD49a双切口酶质粒(h) | sc-401275-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Integrin α1/ITGA1/CD49a双切口酶质粒(h2) | sc-401275-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ITGA1 编码整合素 α1(CD49a)。该蛋白与整合素 β1 形成异源二聚体,构成 α1β1 胶原/层粘连蛋白受体,介导细胞与细胞外基质的黏附以及双向信号传导。通过与黏着斑复合体及包括 FAK/Src、PI3K–AKT 和 MAPK 在内的通路耦联,ITGA1 影响细胞骨架重塑、迁移、生存和机械信号转导。CD49a 在多种组织区室和免疫细胞亚群中表达,支持组织驻留、与基底膜黏附以及基质依赖性的分化等过程。ITGA1 信号失调以及细胞–基质相互作用的改变与纤维化、炎症以及肿瘤细胞侵袭和转移相关,因此是研究由黏附驱动表型的一个有价值的关键节点。
Integrin α1/ITGA1/CD49a 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITGA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITGA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITGA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITGA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。