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IKKγ双切口酶质粒(h) | sc-400274-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
IKKγ双切口酶质粒(h2) | sc-400274-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
IKBKG 编码 IKKγ(NEMO),它是 IKK 复合体的调控亚基,负责将上游受体信号传递与 IκB 蛋白的磷酸化及降解相耦联,从而使 NF-κB 的转录应答得以启动。通过来自 TNFR、IL-1R/TLR、抗原受体以及细胞质应激通路的输入,IKKγ 有助于协调炎症基因表达、先天与适应性免疫信号传导、细胞生存程序以及对 DNA 损伤的应答。IKBKG 的功能受损会扰乱经典 NF-κB 通路的激活,并可能改变细胞因子网络、对凋亡的敏感性以及屏障/外胚层稳态。IKBKG 变异与免疫缺陷和外胚层发育不良表型相关,而异常的 NF-κB 调控也与炎症性疾病机制及致癌信号研究广泛相关。
IKKγ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IKBKG 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IKBKG内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IKBKG的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IKBKG基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。