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IGF-I双切口酶质粒(m) | sc-421056-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Igf1 编码胰岛素样生长因子 I(IGF‑I),这是一种分泌型肽类激素,可在内分泌与旁分泌环境中调控机体生长、细胞存活以及代谢稳态。IGF‑I 主要通过 IGF1R 传递信号,激活 PI3K–AKT–mTOR 和 RAS–RAF–MEK–ERK 通路,协同调控蛋白质合成、葡萄糖利用与细胞周期进程。在肌肉、肝脏、骨骼和大脑等组织中,IGF‑I 将生长激素信号与局部微环境信号整合起来,从而塑造发育、再生与分化程序。IGF‑I 信号失调已在多种模型中被广泛研究,涉及生长异常、胰岛素敏感性、与衰老相关的表型,以及与致癌通路串扰相关的增殖信号等。
IGF-I 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Igf1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Igf1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Igf1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Igf1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。