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IGF-1 Receptor α/β/IGF1RCRISPR激活质粒(m) | sc-421057-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
IGF-1 Receptor α/β/IGF1RCRISPR激活质粒(m2) | sc-421057-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
Igf1r 编码胰岛素样生长因子 1 受体(IGF-1R),这是一种受体酪氨酸激酶,在细胞表面以 α/β 异源四聚体形式发挥作用,负责转导 IGF-1 和 IGF-2 信号。配体结合并发生自磷酸化后,IGF-1R 激活 PI3K–AKT–mTOR 和 RAS–RAF–MEK–ERK 级联通路,整合调控增殖、生存、代谢与分化的多种信号线索。在小鼠模型中,Igf1r 信号对胚胎及出生后生长、组织稳态和应激反应至关重要;其失调与异常生长控制及致癌性信号程序相关。IGF-1R 还与胰岛素受体通路发生串扰,并影响反馈回路,从而塑造受体转运、抗凋亡能力以及细胞能量代谢状态。
IGF-1 Receptor α/β/IGF1R CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Igf1r的表达。
IGF-1 Receptor α/β/IGF1R CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Igf1r基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Igf1r转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性IGF-1 Receptor α/β/IGF1R表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Igf1r位点,并能够研究内源性位点上依赖于IGF-1 Receptor α/β/IGF1R的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Igf1r表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟IGF-1 Receptor α/β/IGF1R通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。