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Id4双切口酶质粒(h) | sc-401380-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Id4双切口酶质粒(h2) | sc-401380-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ID4(DNA 结合抑制因子 4)编码一种螺旋–环–螺旋(HLH)蛋白,但其缺乏 DNA 结合结构域,可通过“隔离”碱性 HLH(bHLH)因子来调控转录,从而影响细胞谱系决定与细胞分化程序。在人类细胞中,Id4 与细胞周期进程调控、神经发育过程以及上皮分化相关,并与更广泛的、由 bHLH 驱动的转录网络相互整合。多种肿瘤类型中均有报道 ID4 表达改变或表观遗传调控异常,并与增殖、侵袭以及干细胞样表型的变化相关,使其成为机制研究中的一个重要节点。作为一种具有情境依赖性的调控因子,ID4 常在细胞模型中被用于研究其对发育通路与致癌信号状态的影响。
Id4 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ID4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ID4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ID4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ID4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。