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HXK I双切口酶质粒(h) | sc-401753-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HXK I双切口酶质粒(h2) | sc-401753-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 HK1 基因编码己糖激酶 I(HXK I)。HXK I 是一种与线粒体外膜相关的酶,催化 ATP 依赖的葡萄糖磷酸化反应,将葡萄糖转化为葡萄糖-6-磷酸,从而使葡萄糖进入糖酵解过程,并支持其进入磷酸戊糖途径。通过将葡萄糖利用与细胞能量需求及氧化还原稳态相耦联,HXK I 影响代谢通量、NADPH 生成以及用于生物合成的前体供给,从而塑造细胞增殖与应激反应。HK1 还可通过相互作用参与线粒体生理过程,调节细胞凋亡信号及细胞存活相关通路。HK1 表达或调控的改变与多种疾病相关情境中的代谢重编程有关,包括神经退行性变、缺血性损伤以及与肿瘤相关的糖酵解表型,因此是研究葡萄糖代谢机制的有用靶点。
HXK I 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。