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HSP 90α双切口酶质粒(m) | sc-420981-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HSP 90α双切口酶质粒(m2) | sc-420981-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Hsp90aa1 编码可诱导的胞质伴侣蛋白 HSP90α,它是蛋白质稳态(proteostasis)网络的核心组分,能够稳定并促进多种客户蛋白的成熟,包括激酶、类固醇受体和转录因子。HSP90α 与 CDC37 等共伴侣蛋白以及 HSP70 体系协同作用,调控蛋白折叠、质量控制以及对应激的信号复合体重塑。通过这些相互作用,它影响 MAPK/ERK、PI3K–AKT 和类固醇激素信号等通路,从而作用于细胞周期进程、细胞凋亡以及对蛋白毒性应激的应答。HSP90α 依赖性的伴侣作用失衡与信号稳健性改变及蛋白质稳态紊乱有关,并已在癌症生物学、神经退行性变和炎症应激等模型中得到关联证据。
HSP 90α 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Hsp90aa1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hsp90aa1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Hsp90aa1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Hsp90aa1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。