Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HSP 90α Antibody (F-2) Alexa Fluor® 647: sc-515081 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of HSP 90α expression in HeLa (A), KNRK (B), Y79 (C), A-431 (D) and Jurkat (E) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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HSP 90α双切口酶质粒(h): sc-400088-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HSP 90α 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HSP 90α双切酶质粒（h）和HSP 90α双切酶质粒（h2）编码针对HSP90AA1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HSP 90α: sc-515081，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HSP 90α双切口酶质粒(h) | sc-400088-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HSP 90α双切口酶质粒(h2) | sc-400088-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HSP90AA1 编码分子伴侣蛋白 HSP90α，这是一种在细胞中含量极高、依赖 ATP 的蛋白稳态（proteostasis）调控因子，可支持多种客户蛋白的折叠、成熟与稳定化，包括激酶、核受体和转录因子。HSP90α 与共伴侣协同参与热休克反应，并整合进调控细胞周期进程、信号转导、应激适应以及蛋白质质量控制的通路。通过缓冲蛋白组不稳定性，HSP90α 影响多蛋白复合体的动态变化以及关键信号节点的周转。HSP90AA1/HSP90α 活性失调与应激耐受性的改变以及致癌与炎症信号网络的重塑相关，因此常成为蛋白稳态与通路依赖性研究中的重点对象。
HSP 90α 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HSP90AA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSP90AA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HSP90AA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HSP90AA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。