
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HSLCRISPR激活质粒(h) | sc-401341-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 **LIPE** 基因编码激素敏感性脂肪酶(HSL)。HSL 是一种关键的中性脂肪酶,能够水解二酰甘油及其他脂质酯,从而调控细胞内脂质动员。HSL 的活性通过 cAMP/PKA 依赖的磷酸化以及与脂滴动态的协同作用,整合儿茶酚胺与胰岛素信号,维持脂肪细胞和类固醇生成组织的能量稳态。LIPE/HSL 调控异常与脂解紊乱、异位脂质堆积以及与胰岛素抵抗和血脂异常相关的代谢表型有关,因此是研究脂质信号与代谢适应的重要靶点。此外,LIPE 依赖的脂质通量还可通过改变脂肪酸可用性及其下游脂质介质,影响炎症通路和细胞应激反应。
HSL CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性LIPE的表达。
HSL CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的LIPE基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于LIPE转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性HSL表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的LIPE位点,并能够研究内源性位点上依赖于HSL的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在LIPE表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟HSL通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。