非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
HRI双切口酶质粒(h): sc-403442-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HRI 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HRI双切酶质粒（h）和HRI双切酶质粒（h2）编码针对EIF2AK1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HRI: sc-365239，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HRI双切口酶质粒(h) | sc-403442-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
EIF2AK1 编码血红素调控抑制因子（heme-regulated inhibitor，HRI）。HRI 是一种应激感知型 eIF2α 激酶，可通过磷酸化 EIF2S1 来调控翻译起始以及整合应激反应（integrated stress response，ISR）。在红系及非红系细胞环境中，HRI 将血红素可用性、氧化应激与蛋白毒性应激联系起来：一方面抑制整体蛋白质合成，另一方面促进以 ATF4 信号为代表的适应性转录程序。这种调控影响蛋白质稳态、氧化还原稳态，以及线粒体与胞质应激通路，从而在营养和铁/血红素波动条件下塑造细胞的生存能力。EIF2AK1–eIF2α 信号失衡已被用于研究与贫血相关的红细胞生成应激、与神经退行性疾病相关的蛋白稳态缺陷，以及肿瘤细胞对微环境应激的适应。
HRI 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EIF2AK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF2AK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EIF2AK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EIF2AK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。