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HP1γ双切口酶质粒(h) | sc-417205-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HP1γ双切口酶质粒(h2) | sc-417205-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
CBX3 编码异染色质蛋白 1γ(HP1γ)。HP1γ 是一种染色质“阅读器”,通过其染色结构域与甲基化的组蛋白 H3 第 9 位赖氨酸(H3K9me)结合,并参与异染色质的组织。HP1γ 通过动态的染色质压缩参与转录的表观遗传调控、基因组稳定性的维持,以及 DNA 复制与修复的协调。通过影响重复序列元件的沉默并调控基因表达程序,CBX3 常被用于研究与细胞周期控制、分化和应激反应相关的通路。在多种癌症及神经发育相关研究中均报道了 HP1γ 相关染色质状态的失调,支持将其作为研究表观基因组驱动表型机制的靶点。
HP1γ 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CBX3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CBX3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CBX3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CBX3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。