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HLA-C双切口酶质粒(h) | sc-401517-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HLA-C双切口酶质粒(h2) | sc-401517-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HLA-C 编码一种经典的 MHC I 类重链,可与 β2-微球蛋白配对,在细胞表面呈递来源于细胞内的肽段,从而使 CD8+ T 细胞能够进行免疫监视。除抗原呈递外,HLA-C 还是抑制性与激活性杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIR)的主要配体,进而塑造自然杀伤(NK)细胞的“教育”过程及其细胞毒反应阈值。通过这些免疫识别过程,HLA-C 与干扰素驱动的抗原加工与呈递通路相衔接,包括蛋白酶体生成肽段以及在内质网中依赖 TAP 的装载过程。HLA-C 的遗传变异及其表达改变与免疫介导和炎症性疾病的易感性相关,并影响宿主–病原体相互作用,因此是开展免疫调控机制研究的关键基因位点。
HLA-C 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HLA-C 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HLA-C内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HLA-C的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HLA-C基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。