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Histone Deacetylase 4 (HDAC4)双切口酶质粒(h) | sc-400388-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Histone Deacetylase 4 (HDAC4)双切口酶质粒(h2) | sc-400388-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 HDAC4 基因编码组蛋白去乙酰化酶 4(HDAC4),属于 IIa 类 HDAC,可在细胞核与细胞质之间穿梭,从而调控染色质可及性与转录程序。HDAC4 在多蛋白共抑制复合物中发挥作用,并整合钙/钙调蛋白依赖性激酶(CaMK)与 14-3-3 信号通路,以调节 MEF2 驱动的基因表达、细胞分化及应激反应相关转录。通过对组蛋白及非组蛋白底物的去乙酰化依赖性调控,HDAC4 参与肌肉与神经系统发育、突触可塑性以及代谢稳态等通路。HDAC4 活性与亚细胞定位的失衡与多种神经发育、神经退行性疾病及肿瘤背景下观察到的异常表观遗传状态相关,因此是开展转录抑制机制研究的一个重要节点。
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HDAC4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HDAC4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HDAC4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HDAC4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。