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Histone Deacetylase 3 (HDAC3)CRISPR激活质粒(h) | sc-400446-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
Histone Deacetylase 3 (HDAC3)CRISPR激活质粒(h2) | sc-400446-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)属于I类HDAC,是NCoR/SMRT共抑制复合物中的核心催化成分,负责从组蛋白尾部以及部分非组蛋白底物上去除乙酰基,从而调控染色质可及性并塑造转录程序。通过对增强子和启动子状态的表观遗传调控,HDAC3参与细胞周期推进、DNA损伤应答以及谱系特异性分化,并整合多种信号输入,影响代谢与炎症相关基因的表达。HDAC3活性或募集过程的失调已被认为与多种疾病背景下异常的转录抑制有关,包括癌症、神经发育障碍以及免疫相关疾病;在这些疾病中,染色质乙酰化状态异常是反复出现的分子特征。作为一个枢纽型表观遗传调控因子,HDAC3常被用于研究其对转录网络、染色质重塑以及细胞身份在不同情境下的调控作用。
Histone Deacetylase 3 (HDAC3) CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HDAC3的表达。
Histone Deacetylase 3 (HDAC3) CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HDAC3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HDAC3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Histone Deacetylase 3 (HDAC3)表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HDAC3位点,并能够研究内源性位点上依赖于Histone Deacetylase 3 (HDAC3)的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HDAC3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histone Deacetylase 3 (HDAC3)通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。