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HEXA双切口酶质粒(h) | sc-405523-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HEXA双切口酶质粒(h2) | sc-405523-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
HEXA 编码 β-己糖胺苷酶 A 的 α 亚基,这是一种溶酶体糖苷水解酶,可与 β 亚基(HEXB)配对,催化 GM2 神经节苷脂及相关糖缀合物的逐步降解。该活性是溶酶体介导分解代谢与脂质稳态的核心环节,使 HEXA 的功能与内吞-溶酶体运输、 自噬与溶酶体的串扰,以及由底物积累触发的细胞应激反应相联系。HEXA 的功能缺失变异与 GM2 神经节苷脂沉积症(泰-萨克斯病)相关,该病也常作为研究模型,用于探讨溶酶体功能障碍如何扰乱神经元生理、膜组成与蛋白质稳态(proteostasis)。作为研究靶点,HEXA 支持在人体细胞模型中开展溶酶体生物学、糖鞘脂代谢以及基因型–表型关系的研究。
HEXA 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HEXA 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HEXA内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HEXA的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HEXA基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。