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HAS2双切口酶质粒(m) | sc-420798-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HAS2双切口酶质粒(m2) | sc-420798-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Has2 编码透明质酸合成酶 2(hyaluronan synthase 2,HAS2)。HAS2 是一种与膜相关的糖基转移酶,在质膜处聚合合成透明质酸,并将其输出到细胞外基质中。HAS2 驱动的透明质酸生成可调控细胞周围基质的组装、组织含水量,以及细胞—基质信号传导;这些过程通过涉及 CD44 和 RHAMM 的通路以及细胞骨架重塑,影响细胞黏附、迁移和增殖。Has2 的活性与发育形态发生、创伤修复、炎症信号传递和成纤维细胞活化密切相关;透明质酸稳态的异常与纤维化、血管重塑以及肿瘤相关基质生物学有关。作为决定细胞外基质力学性质和生长因子可及性的关键因素,Has2 常在上皮—间质转化、血管生成和免疫细胞转运等研究情境中被重点关注。
HAS2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Has2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Has2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Has2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Has2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。