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HAS2双切口酶质粒(h) | sc-401032-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
HAS2双切口酶质粒(h2) | sc-401032-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 HAS2 基因编码透明质酸合成酶 2(hyaluronan synthase 2),这是一种膜相关酶,可在质膜处将 UDP-葡萄糖醛酸和 UDP-N-乙酰氨基葡萄糖聚合生成高分子量透明质酸。HAS2 驱动的透明质酸沉积会塑造细胞外基质(ECM)和细胞周围包被层,并通过与 CD44、RHAMM 等受体的相互作用影响细胞水合状态、黏附与迁移。其活性与调控组织重塑和炎症信号的通路相整合,并受生长因子信号及细胞代谢状态调控。HAS2 表达失调或透明质酸异常积累常在纤维化、慢性炎症以及肿瘤微环境生物学等研究背景中被重点关注。
HAS2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HAS2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HAS2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HAS2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HAS2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。