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GPD2双切口酶质粒(h) | sc-402698-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GPD2双切口酶质粒(h2) | sc-402698-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
GPD2 编码线粒体甘油-3-磷酸脱氢酶,它是甘油磷酸穿梭的关键黄素蛋白组分。该穿梭通过将甘油-3-磷酸的氧化与泛醌的还原偶联,把胞质中的还原当量转移到线粒体内。该活性将糖酵解与氧化磷酸化连接起来,影响细胞氧化还原平衡,并通过调控甘油-3-磷酸储量来支持脂质与甘油脂代谢。通过塑造线粒体电子传递以及活性氧(ROS)的生成,GPD2 在营养应激和与缺氧相关的情境中有助于维持代谢灵活性。GPD2 功能失调已在多种研究模型中被用于探讨其与代谢性疾病表型,以及在癌症与内分泌相关研究中观察到的生物能量状态改变之间的关系。
GPD2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GPD2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GPD2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GPD2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GPD2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。