Date published: 2026-7-25

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GM-CSF双切口酶质粒(m): sc-419840-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • GM-CSF 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • GM-CSF双切酶质粒(m)和GM-CSF双切酶质粒(m2)编码针对Csf2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:GM-CSF: sc-32753,通过WB, IF或者IHC分析
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    GM-CSF双切口酶质粒(m)

    sc-419840-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    GM-CSF双切口酶质粒(m2)

    sc-419840-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    小鼠 Csf2 基因编码粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。GM-CSF 是一种细胞因子,可调控髓系谱系的发育以及单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞的功能性激活。GM-CSF 信号通过结合 GM-CSF 受体复合物,激活 JAK2/STAT5、MAPK/ERK 和 PI3K/AKT 通路,从而协同调控细胞存活、增殖、分化以及炎症介质的产生。在体内,GM-CSF 活性的改变会影响造血、抗原呈递及组织炎症基调,使 Csf2 成为自身免疫、神经炎症、过敏性气道炎症以及髓系驱动病理等模型中的关键节点。这些特性支持在小鼠体系中开展对细胞因子网络机制以及先天—适应性免疫串扰的研究。

    GM-CSF 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Csf2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Csf2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Csf2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Csf2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。