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GM-CSF双切口酶质粒(h) | sc-416919-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
CSF2 编码粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)。GM-CSF 是一种多效性细胞因子,可调控髓系细胞(包括单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞)的存活、增殖与分化。GM-CSF 信号通过异源二聚体的 GM-CSF 受体激活 JAK2/STAT5、PI3K–AKT 和 RAS–MAPK 等通路,进而重塑转录程序,以控制造血过程与炎症反应。在免疫组织与屏障部位,CSF2 参与抗原呈递、细胞因子网络以及白细胞募集,因此与炎症失衡和免疫介导的病理过程相关。CSF2/GM-CSF 活性改变常在自身免疫、慢性炎症性疾病以及肿瘤相关髓系细胞重塑等模型中被重点研究。
GM-CSF 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CSF2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CSF2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CSF2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CSF2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。