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GAP-43双切口酶质粒(h) | sc-400632-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
GAP-43双切口酶质粒(h2) | sc-400632-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 GAP43 基因编码生长相关蛋白 43(GAP-43),这是一种在神经元中富集、与膜相关的磷酸化蛋白,参与调控轴突生长、生长锥运动性以及突触可塑性。GAP-43 是蛋白激酶 C(PKC)的重要底物之一,可通过依赖磷酸化的方式调控肌动蛋白组织与质膜处信号传导,从而参与细胞骨架重塑以及囊泡/膜动力学过程。其表达受发育阶段调控,并在神经元损伤应答中再次诱导表达,使 GAP-43 与神经突再生及活动依赖性的神经回路精细化相关通路相联系。GAP-43 表达水平或磷酸化状态的改变与神经发育及神经退行性相关表型有关,因此常被用作研究神经元连接与修复的标志物及关键机制节点。
GAP-43 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 GAP43 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GAP43内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏GAP43的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了GAP43基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。