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galectin-3双切口酶质粒(h) | sc-417680-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
galectin-3双切口酶质粒(h2) | sc-417680-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
LGALS3 编码半乳糖凝集素-3(galectin-3),这是一种可结合 β-半乳糖苷的凝集素,定位于细胞质、细胞核、细胞表面以及细胞外微环境中,用以调控细胞-细胞与细胞-基质相互作用。Galectin-3 通过依赖糖链的方式对受体与整合素进行支架化组织,从而调节多种关键过程,包括抗凋亡、细胞黏附与迁移、内吞作用以及先天免疫信号传导。它通过影响巨噬细胞活化状态与细胞因子网络来塑造炎症与纤维化程序,并与 MAPK/ERK、PI3K/AKT、NF-κB 及 TGF-β 等信号通路发生交叉。Galectin-3 表达失衡与肿瘤进展及转移、慢性炎症和纤维化相关,因此 LGALS3 是免疫学、肿瘤学与组织重塑机制研究中的一个重要切入节点。
galectin-3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 LGALS3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对LGALS3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏LGALS3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了LGALS3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。