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galectin-1CRISPR激活质粒(h) | sc-400941-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
LGALS1 编码人半乳糖凝集素-1(galectin-1),这是一种可结合 β-半乳糖苷的凝集素,通过与细胞表面及细胞外基质中的糖基化受体相互作用,调控细胞-细胞与细胞-基质之间的相互作用。半乳糖凝集素-1 可影响整合素介导的黏附、免疫细胞信号传导与应激反应,并能在不同情境下调节细胞凋亡、迁移及血管生成相关程序。通过对糖链依赖的受体聚集与信号传递的影响,半乳糖凝集素-1 还会作用于与炎症、肿瘤-基质互作以及组织重塑相关的通路。LGALS1 表达失调与免疫逃逸表型、纤维化过程以及多种癌症类型的进展相关,因此可作为聚焦微环境研究中的关键机制节点。
galectin-1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性LGALS1的表达。
galectin-1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的LGALS1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于LGALS1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性galectin-1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的LGALS1位点,并能够研究内源性位点上依赖于galectin-1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在LGALS1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟galectin-1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。