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G3BP1双切口酶质粒(h) | sc-400745-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
G3BP1双切口酶质粒(h2) | sc-400745-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
G3BP1(G3BP 应激颗粒组装因子 1)是一种 RNA 结合蛋白,在细胞应激过程中协调应激颗粒的成核,并调控 mRNA 的稳定性与翻译。它通过与 40S 核糖体亚基、翻译起始因子以及病毒或细胞 RNA 的相互作用,将 RAS/MAPK、PI3K/AKT 等通路的信号输入连接到转录后层面的基因调控。G3BP1 还通过塑造 RNA 感知与核糖核蛋白复合体的动态变化,参与先天免疫信号传导和抗病毒反应。G3BP1 活性与应激颗粒生物学的失调与癌细胞适应、神经退行性变以及病毒复制机制相关,因此是开展通路解析研究的有用靶点。
G3BP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 G3BP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对G3BP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏G3BP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了G3BP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。