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FUS/TLS双切口酶质粒(m) | sc-433326-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FUS/TLS双切口酶质粒(m2) | sc-433326-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Fus 编码 RNA 结合蛋白 FUS/TLS。FUS/TLS 主要定位于细胞核,作为关键因子协调基因表达的多个步骤,包括转录调控、pre-mRNA 剪接、mRNA 转运以及应激颗粒动态。FUS/TLS 还通过与 DNA 修复机器及染色质相关复合体相互作用,参与 DNA 损伤应答与基因组维护,将 RNA 加工与细胞稳态联系起来。FUS/TLS 功能受损会改变神经元的 RNA 代谢与蛋白质稳态,而其异常定位或聚集已被广泛认为与神经退行性变相关,因此 Fus 成为研究神经系统 RNA 生物学机制的重要靶点。在小鼠模型中,扰动 Fus 提供了一个可操作的体系,用于解析 RNA 调控网络以及与 DNA 修复、应激反应和神经退行性表型相关的通路。
FUS/TLS 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Fus 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Fus内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Fus的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Fus基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。