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FUS/TLS双切口酶质粒(h) | sc-400612-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FUS/TLS双切口酶质粒(h2) | sc-400612-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FUS(FUS/TLS)编码一种多功能的 RNA/DNA 结合蛋白,可在细胞核与细胞质之间穿梭,协调转录、pre‑mRNA 剪接、RNA 转运以及应激颗粒的动态变化。FUS 还通过与 RNA 聚合酶 II 及影响基因组稳定性的修复因子相互作用,参与 DNA 损伤应答(包括双链断裂修复)。FUS 的失调、错位或聚集与神经退行性疾病的发生机制相关,而 FUS 活性的改变也被认为与肿瘤相关的转录程序有关。因此,FUS 常被用作研究人类细胞中 RNA 代谢、蛋白质稳态以及基因毒性应激信号传导的关键节点。
FUS/TLS 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FUS 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FUS内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FUS的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FUS基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。