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FKBP51双切口酶质粒(m) | sc-420365-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FKBP51双切口酶质粒(m2) | sc-420365-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Fkbp5 编码 FKBP51,这是一种免疫亲和蛋白类的共伴侣,可与 HSP90 结合并调控类固醇受体复合体(包括糖皮质激素受体和孕激素受体),从而影响受体敏感性及反馈调节。FKBP51 还可通过影响 AKT/PHLPP 活性以及 NF-κB 相关的炎症程序,参与应激反应信号通路,将蛋白稳态维持与转录调控联系起来。在小鼠体系中,Fkbp5 表达的改变与下丘脑–垂体–肾上腺(HPA)轴信号、代谢稳态以及神经免疫过程的失调有关。这些功能使 FKBP51 成为一个有用的研究节点,可用于在体内及培养细胞中解析伴侣蛋白机制如何与内分泌和应激适应表型相耦联的通路。
FKBP51 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Fkbp5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Fkbp5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Fkbp5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Fkbp5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。