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FcRn双切口酶质粒(h) | sc-400689-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
FcRn双切口酶质粒(h2) | sc-400689-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FCGRT 编码新生儿 Fc 受体(FcRn)。FcRn 是一种与 MHC I 类相关的异源二聚体,可在 pH 依赖的方式下结合 IgG 和白蛋白,从而介导细胞内“拯救”回收以及双向跨胞转运。FcRn 在内体运输通路中发挥作用:在酸性 pH 下分拣配体,并在细胞表面将其释放,因此在抗体稳态、抗原处理和黏膜免疫中起到关键调控作用。在内皮与上皮等组织区室中,FcRn 会影响 Fc 介导的转运与 IgG 再循环,从而在 IgG 可用性与免疫复合物动态至关重要的炎症信号环境中产生影响。通过改变 IgG 持续时间及 Fc 依赖性免疫反应,FcRn/FCGRT 活性的异常已被用于探究自身免疫与炎症性疾病相关机制。
FcRn 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 FCGRT 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FCGRT内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏FCGRT的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了FCGRT基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。