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Factor VII双切口酶质粒(h) | sc-402582-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Factor VII双切口酶质粒(h2) | sc-402582-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 F7 基因编码凝血因子 VII,这是一种维生素 K 依赖性的丝氨酸蛋白酶酶原,主要由肝细胞产生并分泌入血浆。在血管受损时,凝血因子 VII 与组织因子(F3)结合并被转化为活化的凝血因子 VIIa,形成外源性凝血酶原激酶复合体(extrinsic tenase),通过激活凝血因子 X 和凝血因子 IX 启动凝血级联反应,继而产生凝血酶并形成纤维蛋白。组织因子–因子 VIIa 这一轴还可通过蛋白酶激活受体(PARs)与细胞信号传导发生交叉,将止血相关的蛋白水解过程与炎症及血管生物学通路连接起来。F7 的表达或活性异常与出血倾向相关,同时也常在血栓风险以及凝血–炎症串扰的研究背景下被关注。
Factor VII 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 F7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对F7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏F7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了F7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。