Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
NOS3 Antibody (A-9): sc-376751. Western blot analysis of NOS3 expression in A-673 (A), MCF7 (B) and HUV-EC-C (C) whole cell lysates.
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eNOS双切口酶质粒(h): sc-400127-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- eNOS 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- eNOS双切酶质粒（h）和eNOS双切酶质粒（h2）编码针对NOS3的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：eNOS: sc-376751，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
eNOS双切口酶质粒(h) | sc-400127-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
eNOS双切口酶质粒(h2) | sc-400127-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
NOS3 编码内皮型一氧化氮合酶（eNOS）。eNOS 是一种受钙/钙调蛋白调控的酶，可将 L-精氨酸转化生成一氧化氮（NO），从而调节血管张力、血小板反应性以及白细胞–内皮相互作用。eNOS 的活性与 PI3K–AKT 信号通路、剪切应力的机械转导过程相整合，并受到包括磷酸化在内的翻译后调控以及与四氢生物蝶呤（BH4）依赖的氧化还原平衡耦联等机制的影响。NOS3/eNOS 信号失调与内皮功能障碍、血管生成异常以及与心血管和代谢性疾病相关的氧化应激通路有关。作为决定 NO 生物可利用性的核心因素，eNOS 被广泛用于炎症、缺氧反应和血管重塑等模型研究中。
eNOS 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 NOS3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对NOS3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏NOS3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了NOS3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。