Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF4G双切口酶质粒(h): sc-400661-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- eIF4G 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- eIF4G双切酶质粒（h）和eIF4G双切酶质粒（h2）编码针对EIF4G1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：eIF4G: sc-133155，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
eIF4G双切口酶质粒(h) | sc-400661-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
eIF4G双切口酶质粒(h2) | sc-400661-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
EIF4G1 编码人源 eIF4G 支架蛋白，是 eIF4F 复合体的核心组成部分。eIF4F 通过连接 eIF4E、eIF4A、PABP，并经由 eIF3 与 40S 核糖体小亚基桥接，协调帽依赖性 mRNA 翻译起始。eIF4G 通过组织预起始复合体的组装、促进 mRNA 招募与扫描，将调控翻译输出的生长与应激信号整合在一起，其中包括与 mTOR 调控的蛋白质合成及细胞蛋白稳态相关的通路。翻译起始失调以及 EIF4G1 功能改变，常在神经退行性表型及更广泛的应激反应生物学背景下被研究；在这些情境中，选择性 mRNA 翻译的变化可重塑细胞状态程序。作为翻译调控网络中的关键节点，EIF4G1 常用于探究连接 RNA 代谢、蛋白质稳态与信号依赖性蛋白质组重塑的机制。
eIF4G 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 EIF4G1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对EIF4G1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏EIF4G1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了EIF4G1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。