Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
eIF4E Antibody (P-2): sc-9976. Western blot analysis of eIF4E expression in KNRK (A), NIH/3T3 (B), Hep G2 (C), MEG-01 (D), HEK293 (E) and HeLa (F) whole cell lysates.
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eIF4E双切口酶质粒(m): sc-420148-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- eIF4E 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- eIF4E双切酶质粒（m）和eIF4E双切酶质粒（m2）编码针对Eif4e的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：eIF4E: sc-9976，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
eIF4E双切口酶质粒(m) | sc-420148-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
eIF4E双切口酶质粒(m2) | sc-420148-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Eif4e 基因编码 eIF4E，它是 eIF4F 翻译起始复合物中负责帽结构结合的亚基，可识别 7-甲基鸟苷（m7G）帽，并促进核糖体募集到 mRNA 上。eIF4E 的活性通过 mTORC1–4E-BP 调控整合营养与生长因子信号，并与依赖 MAPK/MNK 的磷酸化协同作用，从而精细调控与增殖、代谢和应激反应相关转录本的选择性翻译。eIF4E 的丰度或调控发生改变与翻译重编程及细胞生长程序失调有关，使 Eif4e 成为研究癌症生物学与发育表型中转录后调控的关键节点。在小鼠模型中，扰动 Eif4e 有助于对帽依赖性翻译、蛋白质稳态以及与信号耦联的基因表达进行机制层面的解析。
eIF4E 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Eif4e 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Eif4e内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Eif4e的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Eif4e基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。