EGR1CRISPR激活质粒(m): sc-420133-ACT
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EGR1 CRISPER激活质粒（m）是一种协同激活介质（SAM）转录激活系统，目的在于特定上调基因表达
- EGR1 CRISPR 激活质粒 (m)包含三种质量比为1:1:1的质粒：一种质粒编码与转录激活结构域VP64融合的去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A)，和杀稻瘟素抗性基因；一种质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白，和潮霉素抗性基因；一种质粒编码与两个MS2 RNA适体融合的目标特异的20 nt向导RNA，和嘌呤霉素抗性基因。
- 形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域，为高效激活基因提供转录因子的招募
- 由 EGR1 CRISPR 激活质粒 (m) 和 EGR1 CRISPR 激活质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别针对 Egr1 转录起始位点上游的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EGR1: sc-101033，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EGR1CRISPR激活质粒(m) | sc-420133-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
早期生长反应基因1（Egr1）编码锌指转录因子EGR1。EGR1属于即刻早期基因，可被生长因子、应激信号以及神经元活动迅速诱导。EGR1通过结合富GC的启动子元件，并协调染色质与转录层面的应答，调控细胞周期推进、凋亡、分化以及突触可塑性等程序。在小鼠中，EGR1是MAPK/ERK信号通路下游的关键节点，能够整合钙依赖性通路与炎症信号的输入，从而塑造刺激依赖性的基因表达。EGR1活性失衡与多种情境相关，包括神经适应、免疫激活、纤维化相关重塑以及致癌性转录网络，因此常用于研究“信号到转录”耦联机制的作用机理。
EGR1 CRISPR激活质粒（m）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Egr1的表达。
EGR1 CRISPR激活质粒（m）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的Egr1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于Egr1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性EGR1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的Egr1位点，并能够研究内源性位点上依赖于EGR1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Egr1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟EGR1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。