Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EGFR Antibody (3H2094): sc-71033. Western blot analysis of EGFR expression in HeLa (A) and c4 (B) whole cell lysates.
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EGFR双切口酶质粒(m): sc-420131-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EGFR 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- EGFR双切酶质粒（m）和EGFR双切酶质粒（m2）编码针对Egfr的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EGFR: sc-373746，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EGFR双切口酶质粒(m) | sc-420131-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
EGFR双切口酶质粒(m2) | sc-420131-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 EGFR（Egfr）是一种受体酪氨酸激酶，可与表皮生长因子（EGF）家族配体结合，从而触发受体二聚化、自磷酸化及下游信号传导。被激活的 EGFR 可启动 MAPK/ERK、PI3K–AKT、JAK/STAT 和 PLCγ 等通路，调控细胞增殖、生存、分化以及上皮组织稳态。在小鼠模型中，依赖 Egfr 的信号传导塑造发育程序和创伤应答；EGFR 活性异常也常用于肿瘤学与炎症生物学中研究生长因子信号失调。此外，EGFR 还与内吞转运及反馈调控因子相互作用，这些因子可精细调节信号强度与持续时间，从而支持对受体周转与信号转导动力学的研究。
EGFR 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Egfr 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Egfr内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Egfr的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Egfr基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。