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E2F-2双切口酶质粒(h) | sc-400880-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
E2F-2双切口酶质粒(h2) | sc-400880-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
E2F2 基因编码 E2F-2,这是一种序列特异性的转录因子,通过调控 G1/S 转换和 DNA 复制所需基因的表达来调节细胞周期进程。E2F-2 在 RB–E2F 轴中发挥作用,整合促有丝分裂信号与检查点信号,从而协调细胞增殖、分化与凋亡。E2F2 活性失调与致癌性的细胞周期调控、基因组不稳定性,以及在多种肿瘤背景中观察到的转录程序改变有关。作为增殖信号网络中的一个关键节点,E2F-2 常被用于复制压力、肿瘤抑制通路功能以及 S 期基因转录调控等研究。
E2F-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 E2F2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对E2F2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏E2F2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了E2F2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。