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DSPP双切口酶质粒(h) | sc-401195-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
DSPP双切口酶质粒(h2) | sc-401195-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
牙本质唾液磷蛋白(DSPP)是一种分泌到细胞外基质的前体蛋白,可经蛋白水解加工生成牙本质唾液蛋白(dentin sialoprotein)和牙本质磷蛋白(dentin phosphoprotein)。这两者是矿化组织中的关键成分,参与调控矿物成核、晶体生长以及基质组织结构。在成牙本质细胞中,DSPP 通过协调富含胶原的基质成熟与羟基磷灰石沉积来促进牙本质发生,影响钙/磷酸盐的处理以及细胞外基质重塑。DSPP 的表达水平或序列发生改变会扰乱牙本质矿化动力学,并与遗传性牙本质缺陷相关,因此是研究颅颌面生物学中基因型—表型关系的一个有价值的基因位点。DSPP 也可作为成牙源性分化的标志物,常用于干细胞与发育模型中,以反映细胞外基质信号如何塑造组织结构。
DSPP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DSPP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DSPP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DSPP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DSPP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。