Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Dnmt3a Antibody (C-12): sc-365769. Western blot analysis of Dnmt3a expression in P19 (A), F9 (B) and C6 (C) whole cell lysates.
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Dnmt3a双切口酶质粒(m): sc-420035-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Dnmt3a 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Dnmt3a双切酶质粒（m）和Dnmt3a双切酶质粒（m2）编码针对Dnmt3a的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Dnmt3a: sc-365769，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Dnmt3a双切口酶质粒(m) | sc-420035-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Dnmt3a双切口酶质粒(m2) | sc-420035-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Dnmt3a 编码一种从头（de novo）DNA 甲基转移酶，可在早期发育与谱系决定过程中建立 CpG 甲基化模式，从而塑造稳定的基因表达程序与染色质状态。DNMT3A 在表观遗传沉默网络中发挥作用，并与组蛋白修饰及转录因子占位相互耦联，以调控分化、基因组印记以及转座子抑制。Dnmt3a 的破坏会扰乱甲基组完整性与细胞命运决策，使其成为研究表观遗传记忆、干细胞生物学与造血调控的关键节点。改变 DNMT3A 活性也常被用作机制切入点，用于模拟癌症与发育障碍中观察到的甲基化相关失调。
Dnmt3a 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Dnmt3a 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dnmt3a内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Dnmt3a的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Dnmt3a基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。